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      人對稱性二甲基精氨酸ELISA試劑盒的使用說明

      2025/7/11 16:26:54  作者:江萊生物


      本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)對稱性二甲基精氨酸(SDMA)ELISA檢測試劑盒使用說明書
      人對稱性二甲基精氨酸試劑盒檢測原理:
      人對稱性二甲基精氨酸試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被對稱性二甲基精氨酸(SDMA)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的對稱性二甲基精氨酸(SDMA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

                                     

      人對稱性二甲基精氨酸試劑盒樣品收集、處理及保存方法
      1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。  
      2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
      3、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘。
      4、取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。
      注:標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。


      人對稱性二甲基精氨酸試劑盒操作
      人對稱性二甲基精氨酸試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
      標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。

      人對稱性二甲基精氨酸試劑盒
      1、靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為1.0 nmol/L。
      2、特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
      3、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

      文章關(guān)鍵詞:人對稱性二甲基精氨酸試劑盒,試劑盒產(chǎn)品說明,操作注意事項(xiàng)?

      相關(guān)產(chǎn)品如下:
      商品編號 產(chǎn)品名稱 實(shí)驗(yàn)原理 靈敏度
      JL21897 豬對稱性二甲基精氨(SDMA)ELISA試劑盒 夾心法  1.0 nmol/L

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