干粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理，將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。
其中，濕熱滅菌法又包括四種方式:煮沸法、流動蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來說，使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。
但是對于有些培養基來說，高壓條件會損壞培養基中的某些成分，不利于培養基的使用，所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。本文主要就煮沸滅菌方法進行討論。
有關煮沸滅菌的描述，通常有如下幾種方式:
a、稱取本品41. 5g，加熱溶解于1000mL蒸餾水中，煮沸不要超過2分鐘。無需高壓滅菌。臨用時制備，不得超過3小時。
b、稱取本品50. 3g，加入1000mL蒸餾水中，加熱煮沸至*溶解，冷至45-50℃， 搖勻，傾入無菌平皿備用。無需高壓滅菌。
c、稱取本品89g，煮沸溶解于1000mL蒸餾水中，冷至45-50℃時，傾入無菌平皿，備用。注:無需高壓滅菌。
d、稱取本品57g，加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中，不要過分加熱，冷至50-55℃時，傾入無菌平皿，部分開蓋干燥2h，然后蓋上，備用。無需高壓滅菌。在24小時內使用。
這些方法描述中，都特別強調“無需高壓滅菌”、“不要過分熱”、“煮沸充分溶解”，那么究竟該怎樣操作，才能達到既滅菌*又盡量降低對培養基的破壞呢?
煮沸滅菌的實際操作
1、關于煮沸方式，有人提出可以隔水煮沸，但經過反復試驗，發現這種煮沸方式存在兩大弊端:①溫度不夠，達不到滅菌效果;②經隔水煮沸的含瓊脂培養基，在水浴的過程中易出現分層現象。
2、為了對培養基進行有效煮沸滅菌，根據我們實踐摸索，建議如下操作:
①準備好電磁爐和搪瓷缸(不要用鐵質容器) ;
②將培養基按比例加水，稱量至搪瓷缸中，用玻璃棒不斷攪拌，直至*溶解、無明顯團狀物或顆粒;
③將搪瓷缸置于電磁爐上，大火燒開，期間持續攪拌，避免糊底;當液面*沸騰后，立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開，算是一次煮沸操作;液面回落后，立即放回電磁爐，重復上面的步驟;總共煮沸3次即可。
④將煮好的培養基冷卻至需要的溫度，進行傾注平皿等操作。