“用于氨基酸分析”是什么意思？
“用于氨基酸分析”（常縮寫為AAA）是試劑廠商使用的面向特定應用的級別，用于標明該產品適合氨基酸定量分析流程——經典做法是先對蛋白進行水解，隨后在氨基酸分析儀或HPLC/UPLC/LC–MS方法上完成分離與檢測。實際操作中，這一標注意味著：除極高純度之外，還對胺類/“茚三酮陽性”背景以及其他可能使低含量氨基酸定量產生偏差的干擾做了額外控制。需要強調的是，這是一種供應商的應用級別標注，并非全球統一的單一標準。
“用于氨基酸分析”來源于何處？由誰來“定義”？
AAA工作流程起源于Moore–Stein柱后茚三酮方法，并發展出柱前衍生化/LC與LC–MS；如今它們已被各行業官方方法（USP/Ph. Eur./AOAC/ISO）采納。這些方法本身（而非某個統一的“級別標準”）界定了試劑的性能期望——例如飼料的ISO 13903、AOAC 994.12的過甲酸/酸水解，以及USP/生物技術關于蛋白/肽氨基酸組成的指導。供應商據此進行配方與質量控制（QC），使產品滿足這些方法學需求，并標注為“for amino acid analysis（用于氨基酸分析）”。
AAA級試劑的核心特性與亮點
AAA并不只關乎“標稱的純度高低”——更關鍵在于：不引入被測物（胺類）或會在超高靈敏度氨基酸測定中抬高空白/基線的發色團（chromophores），并且在組分上與水解及衍生化化學（柱后茚三酮、OPA/FMOC、APDS/AQC等）相容。因此，你會看到特定緩沖體系（檸檬酸鋰/鈉）、穩定化茚三酮配方，以及安瓿裝水解酸等，明確以AAA標簽銷售。
- 極低“茚三酮陽性”背景，以避免柱后方法中的假陽性/基線偏移。（Ph. Eur.及相關雜質試驗會專門考察茚三酮陽性物質。）
- 貼合氨基酸流程的配方：例如覆蓋面更廣的檸檬酸鋰緩沖體系；預混茚三酮 + 氫茚三酮（hydrindantin），使對初級/次級胺的響應更均衡。
- 保障性能的包裝（安瓿；用于鹽酸水解劑的堿滴定法標定濃度）。
- 跨行業的方法適配性：從醫藥（蛋白/肽定量）到食品/飼料法規合規，再到臨床譜圖均可匹配。
AAA試劑常見的QC指標
不同供應商/產品的COA（分析證書）項目并不完全相同，但常見包括：
- 含量/濃度（例如：約6M的鹽酸）。
- 用于AAA流程的有機組分的GC/HPLC高純度。（下文以阿拉丁的實例說明）。
- （在適用時）茚三酮/OPA流程的低背景/空白適用性（對“茚三酮陽性”物質的控制是氨基酸雜質檢測中的通行做法）。
AAA試劑應用于何處？
- 生物制藥與生物制劑：肽/蛋白標示含量、按組成進行身份鑒別、工藝/雜質研究。
- 食品與飼料：用于營養表示與飼料配方的總量/游離氨基酸測定（ISO 13903, AOAC）。
- 臨床與代謝組學：血漿/尿液氨基酸面板；細胞培養中的已用/耗竭培養基（spent media）監測。
- 通用科研：植物/微藻與環境樣品分析，配合方法特異的水解/衍生化方案。
阿拉丁的具體產品示例
阿拉丁提供“用于氨基酸分析”的明確級別；示例包括：
- 2-甲氧基乙醇，≥99.7%（GC），用于氨基酸分析
- 三乙胺，≥99.5%（GC），用于氨基酸分析
- L-正亮氨酸，BioReagent，用于氨基酸分析（在部分方法中常用作內標）
AAA與相關級別的比較
- HPLC級：針對低UV吸收與色譜中的低非揮發殘留而優化；但對痕量胺的控制未必達到AAA空白所需水平。進行基于HPLC的AAA時，建議使用HPLC級溶劑并配合AAA級試劑。
- LC–MS級：將不揮發殘留與金屬雜質進一步控制至超低水平，以提升質譜靈敏度；但仍需搭配適用于 AAA 的化學體系（如衍生化試劑盒），以避免胺類背景。
- ACS/AR/puriss p.a.：由藥典/試劑手冊（如ACS Reagent Chemicals）定義的通用分析級。品質高，但并非為氨基酸空白或分析儀流程進行應用定制。
- GC衍生化級/測序級/熒光級：面向特定檢測化學體系而優化（盡量降低各自側重的雜質類別）。在合適場景下可與AAA搭配使用，但并非在所有方法中都能與AAA一對一互換。
選型要點與注意事項
1）將試劑與方法步驟逐一匹配。
- 水解（Hydrolysis）：選擇安瓿裝約6M 鹽酸（HCl）進行酸水解；為保留Trp（色氨酸）使用甲烷磺酸（MSA）；在定量Cys（半胱氨酸）/Cystine（胱氨酸）時按方法需要進行過甲酸氧化。
- 分離（Separation）：用于離子交換分析儀時，按方法表（PF/PH程序）配套使用指定的檸檬酸鋰/鈉緩沖液套裝。
- 衍生化/檢測（Derivatization/Detection）：選擇柱后茚三酮（ninhydrin）或柱前 OPA/FMOC，或用于LC–MS的APDS/AQC類標記試劑；隨后確保所用試劑的級別符合該化學體系的推薦要求（如AAA級試劑、LC–MS級溶劑等）。
2）按正確指標核對COA。
- 關注：含量/濃度（酸類）、GC/HPLC純度（有機組分），以及關于低背景/空白適用性或“茚三酮陽性”控制的說明；同時核對儲存/包裝（如安瓿）。
3）盡量降低污染。
- 使用低胺實驗耗材，避免含胺清洗劑，并嚴控空白——柱后茚三酮尤需如此。（原因：相關方法對“茚三酮陽性”物質高度敏感，易引發信號/抬高基線）。
4）有意識地選擇鋰/鈉緩沖體系。
- 鋰體系通?？煞蛛x更多分析物（生理譜更廣）；鈉體系多用于水解物——遵循分析儀的方法說明。
5）面向LC–MS的AAA。
- 搭配使用符合 AAA 方法學的試劑與 LC–MS 級溶劑，以控制背景信號并降低加合物水平。
常見問答（FAQs）
Q1.我是否始終需要使用AAA級試劑？
如果你采用離子交換/茚三酮或柱前OPA/FMOC等方法對（蛋白水解物、生理體液、細胞培養基）中的氨基酸進行定量，使用AAA級有助于確保空白干凈/穩定（低背景）。
Q2.為什么許多分析儀方法使用檸檬酸鋰緩沖液？
在柱后茚三酮檢測中，鋰緩沖體系有助于在大范圍（≥40 個分析物）的測定中提升分離度/分辨率。
Q3.6M鹽酸水解后還能測色氨酸（Trp）嗎？
不可靠。強酸會破壞Trp；請采用堿性水解或特定的MS流程進行測定。
Q4.常用的內標有哪些？
去甲亮氨酸（Norleucine）在飼料/醫藥方法中很常見（參見ISO 13903的內標配制）。
Q5.我該選擇哪種衍生化方式？
- 柱后茚三酮：穩健、硬件簡單；非常適合分析儀。
- 柱前OPA/FMOC：在HPLC/UPLC上快速且靈敏。（注：OPA不檢測次級胺，因此與FMOC搭配）。
- 面向LC–MS的胺標記試劑（AQC/APDS）：在 質譜上最適合多重/高通量與高靈敏度分析。
為什么選擇阿拉丁的AAA試劑？
- 級別標注與規格清晰：可按“用于氨基酸分析（for amino acid analysis）”篩選，并可一目了然查看GC純度/含量（assay）等關鍵數據。
- COA獲取便捷、覆蓋面廣：可下載COA，并對AAA流程所需的酸、緩沖液、標準品與衍生化組分提供全面覆蓋。
- 方法兼容性強：產品線對映常見AAA方法（分析儀與HPLC/LC–MS使用的離子交換緩沖液套裝/衍生化化學體系），便于將試劑與ISO/AOAC/USP等方法體系對齊。
購買鏈接：：阿拉丁試劑網
